目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在正常生理代谢下对人皮肤成纤维细胞(HSF)自然老化的影响,以及长波紫外线和中波紫外线照射后对HSF的光损伤。方法分离新生儿包皮获得原发性HSF,分为正常生理代谢通道实验组(甲组)和多次紫外线照射实验组(乙组)。EGCG的有效浓度为25毫克升-1。组细胞包括EGCG干预组和空白对照组,培养80天。乙组HSF细胞分组包括空白对照组、EGCG干预组、多UVA组、多UV4-EGCG组、多UVB组和多UVB4-EGCG组,其中UVA和UVB采用文献规定的每日生理剂量,每日照射2周。组织化学染色检测细胞衰老相关β-半乳糖苷酶的表达,观察细胞自然衰老和光照后衰老。流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果EGCG组β-半乳糖苷酶阳性细胞数比正常对照组低47.60%(P <0.05)。正常细胞组和EGCG组仅有少量β-半乳糖苷酶阳性细胞,其他组阳性细胞比例为:多UVA组(多UVA组(EGCG 4-多UVA组)(EGCG 4-多UVA组)。四组阳性率差异有统计学意义(P <0.05)。每日紫外线照射后,HSF细胞凋亡率可上调。与紫外线照射组和紫外线照射组相比,EGCG治疗组细胞凋亡率分别提高了87.08%和56.92%。结论EGCG在生理代谢作用下能延缓HSF衰老。EGCG在紫外线多次照射后能进一步增加细胞衰老和凋亡,这可能是由EGCG降低自然衰老和消除多重光损伤的不同机制造成的。
完成机构:南京医科大学第一附属医院皮肤科,南京210029 [2江苏省中医院皮肤科,南京210029
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