本文研究了40茶株树木春、夏、秋季新芽中EGCG含量的变化。结果表明,40株茶树年平均EGCG含量为6.88%,三季茶树年平均ECCG含量为夏春秋。含量变化最大的是秋梢,变异系数为0.27。同时,获得三个资源:第22号(10.07%)、第31号(10.020)和第39号(10.11%)。EGCG三季平均含量超过10%。
关键词:茶树资源;季节;ECCG
茶叶富含茶多酚,含量高达茶叶干重的20%-33%,包括儿茶素、黄酮和黄酮苷、花色素苷和酚酸类化合物。茶多酚主要由儿茶素组成,儿茶素可分为非酯型儿茶素(简单儿茶素)和酯型儿茶素(复合儿茶素)。其中酯儿茶素的比例最大,约占茶多酚总量的55%,其含量为茶叶干重的12%-19%,包括EGCG、心电图、GCG等成分。EGCG是酯儿茶素。近年来,大量科学研究表明,EGCG是绿茶的主要活性成分。EGCG具有多种功效,在抑菌、抗病毒、预防心血管疾病、镇痛、抗辐射、抗衰老等方面发挥着不可替代的重要作用。茶叶是天然EGCG的唯一来源,EGCG在茶树中的分布差异很大,四川的嫩芽含量最高。茶树是一种多年生植物,表现出季节性轮换生长。它的代谢特征在不同的生长季节有很大的不同。本文主要研究茶树嫩梢中EGCG含量在不同季节的差异,并报告如下分析结果。
1材料与方法
1.1材料
40资源在石门茶区(包括东山峰)选取,摘一芽两叶,蒸固样品,均匀测定EGCG含量。
1.2仪器与化学品
LC-4A高效液相色谱仪(日本岛津)、射频-530检测器、ISC -07Na分离柱、PRR -2蠕动泵、C-R3A数据处理器、爱科普分析实验室净水器(重庆益阳企业发展有限公司)、AB204 -S电子天平、DK-S26电加热恒温水浴锅(上海精密实验设备有限公司)、高速电厂粉碎机(江苏银河天平仪器厂)、电子天平(德国制造):BS2000S
化学品:甲酰胺(色谱纯度)、甲醇(分析纯度)、冰醋酸(分析纯度)。
1.3方法
1.3.1水分含量测定(103±20℃)
清洁铝盒,编号,干燥至恒重,并记下重量。用分尸法取碎茶叶样品,重10.00,放入铝盒中,用电子天平(d=0.0001g克)称重,放入烘箱中,取下盖子,斜放在盒边,在103±2℃烘箱中烘烤4h,盖上盖子取出,放入干燥器中冷却至室温,称重。在103±2℃的烘箱中再烘烤60分钟,然后再次称重。直到两次连续称重之间的差值不超过0.005克,它才是恒重。根据干燥前后的重量差异,计算茶叶样品的含水量。
1.3.2样品制备
研磨样品→过筛→称取0.50克并置于50毫升三角瓶中→加入40毫升30%乙醇→置于水浴中煮沸30分钟←过滤至lOOmL容量瓶→冷却至恒量→取lOuL→用微量注射器→色谱检测。
1.3.3色谱分析
注射体积:10uL;固定相:垫片组,ODS C185LLm,4.6 x150mm,柱温380℃;流动相:水,甲酰胺:甲醇:冰醋酸=40:3601.5;流速:1.1毫升/分钟;检测波长:278纳米。
洗脱梯度如下表
2结果与分析
据报道,不同茶树品种新芽中EGCG含量差异很大,从6%到11%(鲜叶干物质百分比),即品种间差异可达1倍左右。本试验结果表明(表2和表3),在40个资源中,绝大多数新芽的EGCG含量在6%-10%之间,春芽、夏芽和秋芽分别占72.5%、85.0%和47.5%。但在10%以上,春梢、夏梢和秋梢分别占2.5%、7.5%和0%。春芽、夏芽和秋芽
茶树新芽中EGCG含量的多少需要被视为EGCG含量高的特定资源,目前尚无这方面的报道。根据我国茶树种质资源两次筛选的数据,茶多酚含量高于34%的被认为是非常规水平的品种或品系。EGCG的含量一般占茶多酚总量的40%。基于此,如果EGCG的含量高于13%,则可视为具有非常规水平的品种或品系。本试验结果显示(表2):在40个资源中,当春、夏、秋平均值超过130/0时,未发现EGCG含量。超过10010的资源有3种,分别为22种(10.06%)、31种(10.02%)和39种(10.14%),对EGCG的开发利用具有重要价值。
3 Discussion
茶树富含多酚类化合物(简称茶多酚),含量高达鲜叶干重的20% ~ 35%,其中EGCG(表没食子儿茶素-3-没食子酸酯,表没食子儿茶素没食子酸酯)所占比例最大,约占茶多酚总量的40%,含量高达鲜叶干重的8%~14%。在茶树中,它主要由表没食子儿茶素和没食子酸酯化而成。它的关键调节酶受外界条件如光照温度的调节,因此表现出季节性的含量差异。此外,EGCG随着茶树新梢延伸程度的不同而发生显著变化,含量随着延伸程度的增加而逐渐降低。本研究中,EGCG的内容显示了夏春秋的发展趋势。首先,夏季光照强,温度高,茶树光合作用强,碳代谢旺盛,多酚形成总量大于春秋季。因此,EGCG的含量是三季中最高的。就茶叶品质而言,EGCG的含量表现出强烈的涩味,这与杨贤强等人的研究结果是一致的。与秋季相比,春季的含量高于秋季,这可能是由于采摘了相同的一芽两叶原料。由于温度、光照和水分等环境因素,秋季原料木质化程度高于春季。
不同茶树品种的EGCG含量也不同,主要是由于控制酶基因的差异。EGCG的生物合成始于种子萌发,首先合成非酯儿茶素类如左旋和右旋,左旋,然后羟基化或没食子酰化形成阴。因此,不同品种的羟基化和没食子酰化强度差异很大。云南大叶种含有更多简单的儿茶素,被认为保持了其原有的特性。那么EGCG含量高的品种可能是茶树响应外部环境变化而进化的结果,这也说明本研究中40种资源中EGCG的含量是不同的。
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