茶叶籽油的脂肪伴随物成分分析初报

从茶叶粒种子中提取的油是茶叶籽油。茶籽是山茶科山茶的种子。这是明代医学家李时珍(1518-1593)在《本草纲目》年写的。卫生部在2009年第18号公告中正式批准茶籽油为新资源食品。2009年，中国茶园总面积为184.9万公顷。自1965年以来，这个拥有世界上最多茶园的国家，每公顷一般生产大约3000公斤茶叶种子。长期以来，人们把茶籽油和油茶籽油称为茶籽油。事实上，这两种油完全不同。

目前，茶籽油的开发利用在中国正逐步兴起。茶籽油中的大部分脂肪伴随物质是其功能活性成分，这也是解释其自身营养优势的基础。国内外没有相关的详细报道。了解茶籽油中脂肪伴随物的成分对茶籽油的开发具有重要意义。为此，本文对茶籽油的理化性质和主要脂肪伴随物质的组成进行了测定和分析，为今后茶籽油和茶叶新产品的研发提供了依据。

1材料和方法。

1.1材料和仪器1.1.1茶籽油样品

1由实验室在室温下使用6号溶剂通过超声波提取制备。原料是前一年生产的茶叶籽，产于福建福安。样品2号由浙江杨明茶叶生物技术有限公司提供，于2011年1月生产。样品3号由新昌益生茶业科技有限公司生产提供，茶籽原料与样品1号相同，不添加额外抗氧化剂，生产于2011年6月。上述1号油样为浸出原油，未经精炼。2号和3号是工厂生产的商品精炼油。1.1.2试剂美国supelco公司BSTFA TMCS(9933601)试剂公司α胆固醇醇；生育酚混合标准(含α、β、γ和δ)，美国Roche^公司；氢氧化钾、苯酚酒精、无水乙醚、石油醚、无水乙醇、正己烷、甲醇、三氟化硼、氯仿、冰醋酸、碘化钾、硫代硫酸钠、异辛烷、可溶性淀粉、酒石酸钾钠等。都是从国家药物试剂公司购买的。1.1.3仪器FOSS-sinost 310 soxhlet提取系统，FOSS公司；申克旋转蒸发器、SHB-3循环水真空泵、上海申生科技有限公司、AR2140电子分析天平、梅特勒-托利多仪器上海有限公司；沃特世高效液相色谱，二极管阵列检测器:美国沃特世公司；Rancimat 743氧化稳定剂:metrohm公司；Gc-14b岛津气相色谱仪:日本岛津公司；无锡瑞江分析仪器有限公司Rj-tdl-50a低速大容量台式离心机；上海实验仪器厂有限公司Zk-82bb电热真空干燥箱；unico公司Uv-2100分光光度计；无锡华能超声波电子有限公司Hn超声波发生器；Trace gc超气象色谱仪，ISQ质谱检测器，AL 3000自动进样器，Trace公司。1.2茶多酚的测定方法参照国标21733-2008测定油中茶多酚的含量。色谱条件:DB-5柱，30米长，内径0.25毫米，称取200 ~ 300毫克样品，加入胆固醇醇作为内标(制备1毫克/毫升正己烷溶液，加入0.5毫升)，皂化后用正己烷萃取，干燥，用bstfa tmcs(99:1)试剂硅烷化。进样量为0.2微升，分流比为12033601，升温程序为200℃1分钟，升温速度为25℃/分钟至250℃，升温速度为5℃/分钟至280℃，检测器和进样口温度为290℃15分钟。

1.2.1过氧化值、酸值和AOM值的测定

油样品的过氧化值由5538-2005测定，酸值由GB/T 5530-2005测定，AOM值由参照TB/T 21121-2007的R743氧化稳定剂测定。

1.2.2脂肪酸组成的测定

参考CP7489色谱柱，100米* 0.25毫米* 0.20微米，甲酯化后1ul样品，升温程序保持在80℃3分钟，升温速度保持在15℃/分钟至215℃，检测器保持在20分钟，入口温度220℃

1.2.4生育酚含量的测定

用高效液相色谱法测定。称取108份油样，精确到0，0018，将其放入10毫升棕色容量瓶，用正己烷溶解，超声后固定体积，离心，取20微升样品。Sehperisorb硅胶柱，流动相为正己烷:异丙醇=98.533601.5，1毫升/分钟，柱温25℃，检测波长295纳米。制备混合生育酚标准正己烷溶液。浓度为1毫克/毫升。采用外标法测定生育酚含量。分别注射标准样品和三个样品。每种生育酚的保留时间由标准样品确定。同时，可以根据标准样品的总浓度和总峰面积之间的关系来计算样品中四种构型的生育酚含量和总生育酚含量。

1.2.5甾醇和角鲨烯的测定

质谱条件:传输线温度250℃，离子源温度250℃，电离模式EI，分子离子碎片扫描范围力m/z50-550。三个样品的茶多酚含量测定结果如表3所示。从表3可以看出，茶籽原油中茶多酚含量最高，明显高于精制2号和3号，甚至是2号的近6倍，超过400毫克/千克。然而，茶多酚是一种亲水性好的多酚羟基化合物，很难稳定地存在于油体系中。直接添加通常会导致油浑浊。因此，可以推断，茶籽油中包含的茶多酚很可能是茶多酚的酯化合物，即茶多酚酯，其在油体系中相对稳定。一般来说，茶籽油含有相当数量的茶多酚，其存在形式有待进一步研究。2.3茶籽油中生育酚的含量三个样品中生育酚的含量如表3所示。从表中可以看出，α-生育酚占茶籽油中生育酚的大部分，并且还含有少量γ-生育酚和δ-生育酚，但是三个样品中没有一个含有β-生育酚。生育酚2号的含量明显较低，这可能是由于较高的精制程度造成的。2.4茶籽油中角鲨烯的含量

2.1三种样品酸值、过氧化值、AOM值和脂肪酸组成的测定结果见表1。三种茶籽油的过氧化值、酸值和AOM值不同，这与它们的精炼程度和贮存期有关。本文选择了几种不同精炼程度的茶籽油，并对其脂肪伴随成分进行了大范围的分析和研究。

三个样品的主要脂肪酸组成测定结果见表2。关于茶籽油的主要脂肪酸组成有很多报道，有时有很大的差异。原因可能是不同产地的茶籽品种不同，但也可能是茶籽混入了茶叶原料中。不同精炼程度和不同生产时间的几种茶籽油的过氧化值、酸值和AOM值相差很大，但主要脂肪酸组成基本相同。

2.2茶籽油中茶多酚含量

三种样品角鲨烯含量见表3。通过角鲨烯含量的比较，可以看出茶籽油角鲨烯含量的波动范围为120-280mg/kg，差异的具体原因有待进一步研究。

2.5茶籽油中甾醇和其他成分的分析

三个样品的总离子流图的峰时间基本相同，峰形状相似，因此只列出样品2的总离子流图，如图1所示。图2是对应于羊毛甾醇峰的质谱和分子结构式。在图中，清楚地显示了羊毛甾醇的M/Z393 [M-CH3-TMSO]峰，和m/z 483(17)是[m-ch3]，以及羊毛甾醇的D-环裂解离子峰，M/Z227 (15)，241≤25，255 (12)。甾醇特征峰m/z在图中不是很明显，但也可以看到。另一个甾醇特征峰m/z 69(100)非常明显。综合谱库的比较结果可以确定为羊毛甾醇。同样，通过分析和比较麦角甾二烯醇的质谱，可以确定该物质是△ 7，22-麦角甾二烯醇。

经过计算，三个样品中酒精和其他成分的含量如图3所示。Gc-ms分析表明，三种茶籽油样品的分析结果相对一致，甾醇类和三萜类化合物的种类和保留时间基本一致。Gc-ms分析表明，羊毛甾醇是茶籽油中含量最丰富的甾醇，其次是△7，22-麦角甾二烯醇，全名为24-甲基胆固醇-7，22-二烯-3-醇。羊毛甾醇是二甲基甾醇，通常在天然植物油中找不到。另一方面，麦角甾醇通常存在灵芝和树木舌头等真菌中，而不是狭义的植物酒精。它们比普通植物残醇具有更特殊和更强的生物活性，麦角甾醇是维生素D合成的前体。在茶籽油中发现这两种醇具有重要意义。

相比之下，在茶油中只检测到谷甾醇，一种植物油中常见的醇，而没有发现其他常见的植物甾醇(菜油甾醇、菜油甾醇和豆甾醇)。

三个样品中麦角二烯醇、羊毛甾醇和谷甾醇等甾醇的总量可达2000毫克/千克左右，植物甾醇(麦角二烯醇和谷甾醇)的含量只能接近。这些甾醇的存在将是开发茶籽油作为健康食用油的主要基础。

通过测量三种不同茶籽油样品中几种脂肪伴随组分的含量，发现茶籽油中茶多酚的含量为300-400 mg/kg。生育酚总含量为300-500毫克/千克，主要是“α-生育酚”；植物甾醇总量可达1000-2000毫克/千克；角鲨烯含量约为200毫克/千克。特别是茶籽油中所含的醇类与普通植物油有很大不同，这对茶籽油和茶籽油的开发具有指导意义。